Fik V. B.

Danylo Halytsky Lviv National Medical University, Ukraina

Aerobic microflora of microbiotop’s of the oral cavity during prolonged opioid intoxication in experiment

Резюме. Микробиологическое исследование ротовой полости крыс-самцов на фоне длительного введения опиоида показало, что преобладают вирулентные бактерии некротического и цитотоксического действия.

Ключевые слова: опиоид, животные, ротовая полость.

Современная стоматология. – 2015. – №1. – С. 81–83.

Summary. Microbiological research of male rat’s oral cavity against the background of long-term administering of opioid showed that virulent bacteria necrotic and cytotoxic action prevail.

Keywords: opioid, animals, oral cavity.

Sovremennaya stomatologiya. – 2015. – N1. – P. 81–83.

Увеличение числа наркозависимых людей, тотальное распространение наркомании, которая приобретает характер пандемии, приводит к тяжелым социальным последствиям. Результаты исследований свидетельствуют о том, что у опиоидозависимых людей развиваются существенные повреждения зубочелюстной системы [10]. Наиболее часто втречается пародонтит, который образует в ротовой полости очаги хронической инфекции. Таким образом, данная патология имеет не только медицинский, но носит и социальный характер [1, 4, 5, 9].

Сегодня роль микробного фактора в развитии пародонтита не вызывает сомнения, однако недостаточно экспериментальных работ, которые позволили бы проанализировать этиологическую роль микроорганизмов и других пародонтопатогенных факторов [2, 13]. Установлена важная роль анаэробных неспоровых микроорганизмов в развитии пародонтита, в том числе и у опиоидозависимых людей [1, 3, 9, 10]. Видовой состав анаэробной микрофлоры достаточно изучен, однако роль конкретных видов микроорганизмов в развитии патологических процессов окончательно не установлена. Это связано с трудностями выявления и выделения анаэробов, их идентификации, а также обусловлено недостаточным изучением факторов патогенности данной группы микроорганизмов [1–3, 6, 12, 14]. Вместе с тем изучение колонизации условно-патогенной микрофлоры разных экологических ниш ротовой полости, критериев их патогенности является необходимым условием для оценки микробного фактора и экологической значимости микроорганизмов при стоматологической патологии у опиодозависимых людей [1, 3, 9, 10].

Биоценозы патологических очагов в кариозных полостях и пародонтальных карманах заселены аэробными бактериями, которые являются синергистами анаэробов. Среди аэробов наиболее часто встречается St. aureus, который способен колонизировать слизистые оболочки, что связано с тропизмом к эпителиоцитам и широкими адаптационными возможностями [6, 11]. Однако сегодня не выделены микроорганизмы и специфические факторы, которые детерминируют развитие заболеваний ротовой полости. В связи с этим формируется понятие о микробиоме как о целостной системе, которая имеет важное значение в физиологических и патологических процессах в ротовой полости.

Цель исследования – определение микробного этиологического фактора, обусловливающего патологические изменения в тканях пародонта и слизистой оболочке при гнойно-воспалительных процессах в ротовой полости крыс при длительной опиоидной интоксикации.

Материалы и методы

Эксперимент проводили на 20 белых крысах-самцах линии Вистар (3,5–7,5 месяца, масса тела 200 г). Животные находились в условиях, регламентированных «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Визуально анализировали состояние слизистой оболочки ротовой полости, обращая внимание на отсутствие патологических явлений.

В эксперименте смоделировали состояние, которое вызывает изменение поведенческих реакций при длительном влиянии опиоида по типу абстинентного синдрома. Опиоидную интоксикацию у животных воспроизводили путем внутримышечного введения на протяжении 14 недель опиоидного анальгетика (налбуфин, производное морфина), ежедневно, с постепенным, через каждые 2 недели, повышением дозы, в зависимости от массы тела[7].

Бактериологические исследования проводили в начале и в конце эксперимента на фоне патологических изменений в ротовой полости [8]. Осуществляли микроскопическое исследование мазков, окрашенных по Грамму, и бактериологические посевы для оценки видового и количественного состава микрофлоры. Образцы материала забирали с поверхности зубов, десен, зубодесневых карманов и язв.

Количественные показатели определяли в колониеобразующих единицах на 0,02 мл (КУЕ\0,02 мл) при посеве на соответствующую среду стандартного объема мясо-пептонного бульона, куда суспендировали материал из ротовой полости животных. Выделенные культуры идентифицировали согласно морфотинкториальным, культуральным и биохимическим особенностям. Паралельно готовили препараты-мазки для микроскопического исследования по Грамму. В мазках оценивали наличие клеточных элементов слизистой, эритроцитов, лейкоцитов и морфотинкториальные типы микрофлоры.

Результаты и обсуждение

При длительной опиоидной интоксикации наблюдали изменения поведения животных по типу абстинентного синдрома. Отмечали потерю массы тела на 15–20%. В ротовой полости выявлены гнойно-воспалительные изменения с переходом в некроз, особенно по краю десен. Результаты микроскопического исследования микрофлоры указаны в табл. 1.

Таблица 1. Результаты микроскопического исследования состава микробиотопов ротовой полости белых крыс

В слизистой оболочке преобладает кокковая микрофлора, разрушение клеточных элементов при некротических процессах, которые, возможно, развиваются вследствие цитотоксического действия факторов вирулентности бактерий. В зубодесневых карманах превалирует грамотрицательная микрофлора, которую, согласно морфотинкториальным особенностям, можно отнести к бактероидам. В области язв выявлены однотипные кокковые микроорганизмы, отсутствует лейкоцитарная реакция, микрофлора включает несколько морфологических типов бактерий (рис. 1). Результаты бактериологических исследований указаны в табл. 2.

Таблица 2. Результаты бактериологического исследования состава микробиотопов ротовой полости крыс

Полученные данные отображают некоторые аспекты сложных процессов, которые развиваются в ротовой полости животных при длительной опиоидной интоксикации. Состав и количественные характеристики микрофлоры отдельных биотопов имеют особенности, которые зависят от типа патологического процесса. При гнойно-воспалительных изменениях с слизистой оболочки полости рта выделяются несколько видов бактерий, где преобладает золотистый стафилококк (рис. 2), коагулазоотрицательные стафилококки, альфа- и бета-гемолитические стрептококки. При некротических процессах St. aureus и гемолитические эшерихии у животных обнаруживаются реже, однако их концентрация увеличена в 2 раза. Гемолитические стрептококки выявлены у 50% обследованных животных, возрастает содержание грамположительных аэробных палочек в процентном и количественном показателях.

В зубодесневых карманах преобладает золотистый стафилококк в комбинации с 2–3 видами других бактерий: альфа  и бета-гемолитическими стрептококками, гемолитическими эшерихиями и грамположительными палочками. При некротических процессах золотистый стафилококк обнаруживали реже (правда, отмечали высокую концентрацию). В значительном количестве выделяли гемолитические эшерихии и грамположительные палочки. С язв чаще выделяли монокультуры. При гнойно-воспалительных процессах – преимущественно St. aureus. При некротических процессах преобладает ?-гемолитические стрептококки и грамположительные палочки.

Таким образом, на фоне длительного введения опиоидного анальгетика развивались патологические процессы в разных микробиотопах ротовой полости животных, которые обусловлены преобладанием бактерий, которым характерно факторы вирулентности некротического и цитотоксического действия.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Баязитова Л. Т., Мухамеджанова Л. Р., Горячев Д. Н. Микроэкология биотопов полости рта наркозависимых пациентов // Клинич. стоматология. – 2011. – № 2. – С. 88–91.

2. Близнюк Г. О. Обгрунтування принципів раціональної гігієни порожнини рота у хворих із загостреним перебігом генералізованого пародонтиту: автореф. дис. … канд. мед. наук: 14.01.22. – Стоматологія. – Одеса, 2006. – 20 с.

3. Дмитриева Л. А. Пародонтит. – М., 2007. – 504 с.

4. Зорина О. А. Взаимосвязь качественного и количественного состава биоценозов ротовой полости и индивидуального генетического профиля на фоне воспалительных заболеваний пародонта: автореф. дис. … докт. мед. наук: 14.01.14. – М., 2011.

5. Лебедев Д. В. Микробиоценозы полости рта у больных генерализированным парадонтитом, способ диагностики и коррекции: автореф. дис. … канд. мед. наук: 03.02.03. – Микробиология. – М., 2011. – 23 с.

6. Матисова Е. В. Колонизация условно-патогенными микроорганизмами слизистой оболочки полости рта при хроническом пародонтите: автореф. дис. … канд. мед. наук: 03.02.03. – Микробиология. – Волгоград, 2010. – 22 с.

7. Патент № 71438 Україна, МПК 2006.01. Спосіб моделювання поведінкових реакцій в експериментальних тварин при хронічному впливі опіоїду / Пальтов Є. В., Фік В. Б., Вільхова І. В., Онисько Р. М., Фітькало О. С., Кривко Ю. Я.; Заявник і патентовласник Львівський нац. мед. ун-т ім. Д. Галицького. – Номер заявки u 2012 00427; заявл. 16.01.2012; опубл. 10.07.2012. – Бюл. № 13.

8. Патент № 79565 Україна, МПК 2006.01.Спосіб контролю за розвитком гнійно-запальних процесів ротової порожнини на фоні впливу опіоїдного анальгетика в умовах моделювання / Фік В. Б., Федечко Й. М., Кривко Ю. Я., Пальтов Є. В., Онисько Р. М., Фітькало О. С.; Заявник і патентовласник Львівський нац. мед. ун-т ім. Д. Галицького. – Номер заявки u 2012 12479; заявл. 01.11.2012; опубл. 25.04.2013. – Бюл. № 8.

9. Фурса А. А. Особенности диагностики и лечения острых гнойных заболеваний мягких тканей у больных с диссоциальным типом поведения: автореф.дис. … канд. мед. наук: 14.01.17. – Хирургия. – М., 2011. – 21 с.

10. Фурсова А. Д. Патогенетические особенности стоматологического статуса и лечения наркоманов в зависимости от стажа опиоидной зависимости и выраженности абстинентного синдрома: автореф. дис. … канд. мед. наук: 14.00.21. – Стоматология. – М., 2009. – 26 с.

11. Bassetti, S. Staphylococcus aureus infections in Injection Drug Users: Risk Factors and Prevention Strategies / S. Bassetti, M. Battegy // Infection. – 2004. – N 32. – P. 163–169.

12. Borges M. A., de Figueiredo L. C., de Brito R. B. et al. Microbiological composition associated with vitamin D receptor gene polymorphism in chronic periodontitis // Braz. Oral Res. – 2009. – Vol. 23, N 2. – P. 203–208.

13. Damir, T. Effects of different blood groups on the reproduction of periodontal pocket bacteria / T. Damir, H. Uslu, R. Orbac, U. Altoparlak, A. Ayyildiz // Int. Dent. J. – 2009. – Vol. 59 (2). – P. 83–86.

14. Lee Y., Straffon L. H., Welch K. B. et al. The transmission of anaerobic periodontopathic organisms // J. Dent. Res. – 2006. – Vol. 85, N 2. – P. 182–186.

Современная стоматология. – 2015. – №1. – С. 81-83.

Внимание! Статья адресована врачам-специалистам. Перепечатка данной статьи или её фрагментов в Интернете без гиперссылки на первоисточник рассматривается как нарушение авторских прав.